جستجوی مقالات فارسی – توسعه تست آویدیته الایزا با استفاده از پروتئینهای نوترکیب برای تمایز عفونت حاد …
۱-۶-بیماریزایی ۲۲
۱-۷-توکسوپلاسموزیس مادرزادی……………………………………………………………………………………………….. ۲۴
۱-۸-تظاهرات بالینی ……………………………………………………………………………………………………………………. ۲۵
۱-۹-تشخیص توکسوپلاسموز………………………………………………………………………………………………………. ۲۹
۱-۹-۱- تشخیص مستقیم…………………………………………………………………………………………………………… ۲۹
۱-۹-۱-۱-تشخیص هیستولوژی (بافت شناسی…………………………………………………………………………. ۲۹
۱-۹-۱-۲- جداسازی توکسوپلاسما گوندی……………………………………………………………………………….. ۳۰
۱-۹-۱-۳-تکنیک واکنش زنجیری پلیمراز (PCR1-15-2-تشخیص غیر مستقیم……………… ۳۰
۱-۹-۲-تشخیص غیر مستقیم ……………………………………………………………………………………………………… ۳۱
۱-۹-۲-۱- تست رنگی سابین – فلدمن……………………………………………………………………………………. ۳۴
۱-۹-۲-۲- سنجش آنتی بادی فلوئورسنت غیر مستقیم………………………………………………………….. ۳۴
۱-۹-۲-۳- تست سنجش آگلوتیناسین ایمنوسوربنت………………………………………………………………. ۳۵
۱-۱۰-الایزا (ELISA)…………………………………………………………………………………………………………………. ۳۵
۱-۱۰-۱- الایزای مستقیم ………………………………………………………………………………………………………….. ۳۶
۱-۱۰-۲- الایزای غیر مستقیم……………………………………………………………………………………………………. ۳۶
۱-۱۰-۳- الایزای ساندویچ…………………………………………………………………………………………………………… ۳۷
۱-۱۰-۳-۱-الایزای ساندویچ مستقیم………………………………………………………………………………………… ۳۷
۱-۱۰-۳-۲-الایزای ساندویچ غیر مستقیم…………………………………………………………………………………. ۳۷
۱-۱۰-۴- الایزای رقابتی یا مهاری………………………………………………………………………………………………. ۳۷
۱-۱۱-کاربرد پروتئین های نوترکیب در تشخیص توکسوپلاسماَ………………………………………………. ۳۸
۱-۱۲-تولید پروتئین نوترکیب…………………………………………………………………………………………………….. ۳۹
۱-۱۳-تشخیص سرولوژی توکسوپلاسموزیس در دوران حاملگی……………………………………………… ۳۹
۱-۱۴-ارزش تشخیصی ایزوتایپ های مختلف ایمونوگلوبولین
اختصاصی توکسوپلاسما در تشخیص عفونت……………………………………………………………………………….. ۴۰
۱-۱۵-کاربرد IgGAvidity در افتراق عفونت حاد از مزمن توکسوپلاسموزیس……………………… ۴۲
۱-۱۶-درمان ۴۴
۱-۱۷-پیشگیری ۴۷
۱-۱۸- بیان مسئله و اهمیت آن………………………………………………………………………………………………….. ۴۸
۱-۱۹- دلایل انتخاب موضوع ……………………………………………………………………………………………………… ۵۰
۱-۲۰-اهداف و فرضیا ت ……………………………………………………………………………………………………………. ۵۱
فصل دوم: مروری بر تحقیقات گذشته
۲-۱- مروری بر تحقیقات گذشته …………………………………………………………………………………………………………….. ۵۳
فصل سوم: مواد و روشها
۳-۱- تخلیص پروتئین با روش کروماتوگرافی تمایلی ……………………………………………………………….. ۵۹
۳-۱-۱-مکانیسم تخلیص پروتئین با روش کروماتوگرافی تمایلی……………………………………………… ۵۹
۳-۱-۲- تهیه و تخلیص پروتئین های نو ترکیب rGRA7 (pUET-GRA7) و
rGRA6(PUET-GRA6 ……………………………………………………………………………………………………………… ۶۰
۳-۲- بررسی و تائید پروتئین های تخلیص شده……………………………………………………………………….. ۶۲
۳-۲-۱- بررسی و تائید پروتئین های نوترکیب GRA7 و GRA6 بوسیله آنالیز SDS-PAGE ۶۲
۳-۲-۲- تائید هویت پروتئین بیان شده با روش وسترن بلات………………………………………………….. ۶۶
۳-۳- دیالیز نمونه های تخلیص شده…………………………………………………………………………………………… ۷۱
۳-۴- تعیین غلظت پروتئین………………………………………………………………………………………………………… ۷۱
۳-۵- سیستم های الایزا(اصول کار) …………………………………………………………………………………………… ۷۱
۳-۵-۱- طراحی سیستم های الایزا…………………………………………………………………………………………….. ۷۲
۳-۵-۱-۱- نکات تکنیکی در الایزا……………………………………………………………………………………………… ۷۲
۳-۵-۱-۲- برخی مشکلات در الایزا…………………………………………………………………………………………… ۷۴
۳-۶- بررسی پتانسیل PUET-GRA7 و PUET-GRA6 در تشخیص عفونت حاد و مزمن …
توکسوپلاسموز با روش الایزا………………………………………………………………………………………………………….. ۷۶
۳-۶-۱-برقراری شرایط الایزا……………………………………………………………………………………………………….. ۷۶
۳-۶-۲- استفاده از لیزات باکتری در الایزا ………………………………………………………………………… ۷۶
۳-۷- اندازه گیری میزان آنتی بادی به روش الایزای غیر مستقیم …………………………………… ۷۷
۳-۸-تعیین Cut off در روش الایزا ………………………………………………………………………………………….. ۸۰
۳-۹- اندازه گیری میزان آنتی بادی IgG با کیت تجاری Euroimmun ………………………………… ۸۱
۳-۱۰- اندازه گیری میزان آنتی بادی IgM با کیت تجاری Euroimmun ……………………………… ۸۲
۳-۱۱- برقراری شرایط بهینه به منظور محاسبه Avidity Index IgG ………………………………… ۸۲
۳-۱۲- اندازه گیری IgG Avidity Index با استفاده از پروتئین های نوترکیب PUET-GRA7 و
PUET-GRA6 ۸۳
۳-۱۳- اندازه گیری IgG Avidity Index با استفاده از کیت تجاری EUROIMMUN ….. ۸۳
۳-۱۴- اندازه گیری IgG Avidity Index با استفاده از کیت تجاری Microgen………………… ۸۵
۳-۱۵- محاسبه اندکس اویدیته نسبی (RAI) Relative avidity Index ……………………………… ۸۸
۳-۱۶- کنترل کیفی ……………………………………………………………………………………………………………………. ۸۸
۳-۱۶-۱- حساسیت ……………………………………………………………………………………………………………………. ۸۸
۳-۱۷-طراحی تحقیق ……………………………………………………………………………………………………………. ۸۸
۳-۱۸- تعداد نمونه و روش نمونه گیری ………………………………………………………………………………….. ۸۹
۳-۱۸-۱- تعداد نمونه …………………………………………………………………………………………………………………. ۸۹
۳-۱۸-۲- روش نمونه گیری………………………………………………………………………………………………………… ۸۹
فصل چهارم: نتایج آزمایشات
۴-۱ :تهیه و تخلیص پروتئین های نو ترکیب rGRA7 (pUET-GRA7 و rGRA6
(PUET-GRA6 ۹۲
۴-۲- تایید هویت پروتئین های تخلیص شده با روش وسترن بلات ……………………………………….. ۹۳
۴-۳- بررسیIgG,IgM,IgG Avidity نمونه های سرمی با کیت استاندارد Euroimmun ۹۴
۴-۳-۱- نتیجه آزمایشات IgG ELISA مخصوص توکسوپلاسما سرمهای
ایرانی با کیت Euroimmun…………………………………………………………………………………………………………… . ۹۵
۴-۳-۲- نتیجه آزمایشات IgM ELISA مخصوص توکسوپلاسما سرمهای با کیت Euroimmun ۹۵
۴-۳-۳-نتیجه آزمایشات IgG Avidity ELISA مخصوص توکسوپلاسما سرم ها
با کیت Euroimmun …………………………………………………………………………………………………………………… ۹۶
۴-۴- برقراری شرایط ELISA Avidity با پروتئین های نوترکیب ………………………………………. ۱۰۰
۴-۵- نتایج آزمایش Avidity ELISA با استفاده از پروتئین نوترکیب GRA6 برای تمایز
| منبع فایل کامل این پایان نامه این سایت pipaf.ir است |
عفونت حاد ومزمن در سرم های زنان باردار……………………………………………………………………………….. ۱۰۳
۴-۶- نتایج آزمایش Avidity ELISA با استفاده از پروتئین نوترکیب GRA7 برای تمایز
عفونت حاد ومزمن در سرم های زنان باردار ایران …………………………………………………………………….. ۱۰۳
۴-۷- بررسی نتایج ناهمخوان بین الایزا اویدیته با پروتئین های GRA6 وGRA7 و کیت
Euroimmun با استفاده از کیت Microgen………………………………………………………………………………. ۱۰۴
فصل پنجم:بحث، پیشنهادات
منابع ۱۲۱
خلاصه انگلیسی ………………………………………………………………………………………… ۱۲۷
ضمائم ۱۲۹
فهرست جداول
عنوان صفحه
جدول۳-۱: جدول ارزیابی اویدیتی در کیت میکروژن……………………………………………………………….. ۸۷
جدول ۴-۱: نتایج آزمایشات Avidity ELISA,IgG,IgM سرم ها با کیت Euroimmon……… ۹۷
جدول ۴-۲: بررسی نتایج ناهم خوان با کیت های Microgen,Euroimmun و پروتئین های
GRA6 وGRA7 ……………………………………………………………………………………………………………………. ۱۰۶
جدول شماره ۴-۳: نتایج آزمایش IgG وIgG Avidity با پروتئین های GRA6 و GRA7
بر روی سرم های زنان باردار ………………………………………………………………………………………………… ….. ۱۰۸
فهرست شکل ها
عنوان صفحه
شکل۱-۱- شکل شماتیک یک تاکی زوایت و یک برادی زوایت توکسوپلاسما گوندی ………….. ۴
شکل۱-۲- عکس میکروسکوپ الکترونی یک تاکی زوایت، سوش VEGکه در حال
نفوذ به یک نوتروفیل صفاق موش می باشد…………………………………………………………………………………. ۷
شکل۱-۳- عکس میکروسکوپ الکترونی از تاکی زوایت سوش VEG در حال تقسیم
اندودیوژنی داخل ماکروفاژ صفاق موش………………………………………………………………………………………… ۸
شکل۱-۴- یک کیست بافتی توکسوپلاسما که حاوی بیش از هزار برادی زوایت می باشد……. ۹
شکل ۱-۵- راه های انتقال انگل توکسوپلاسما گوندی در میزبان اصلی و حد واسط……………… ۱۶
شکل ۱-۶- دختری با هیدروانسفالی بعلت توکسوپلاسموز مادرزادی……………………………………….. ۲۵
شکل ۱-۷- شکل شماتیک انواع الایزا…………………………………………………………………………………………. ۳۸
